真菌检查包含直接镜检（依感染部位取相应标本，如皮肤取皮屑、毛发拔带菌丝病发，加10%-20%氢氧化钾溶液后镜检菌丝或孢子）、真菌培养（标本接种专用培养基，适宜温度培养观察菌落形态等初步判种类）、组织病理学检查（活检取病变组织，制病理切片用HE、PAS等染色观察真菌在组织内形态分布）、血清学检查（抗原检测如半乳甘露聚糖等试验，抗体检测受感染时间等影响需结合临床）、分子生物学检查（PCR扩增真菌特异性DNA片段检测，对设备技术要求高有污染风险），特殊人群检查有不同注意事项，儿童注重采集舒适性安全，老年人评估基础疾病，妊娠期女性权衡对胎儿影响，长期免疫抑制剂使用者重点关注相关标本检测。
一、直接镜检
1.标本采集：根据感染部位选取相应标本，如皮肤病变取皮屑、毛发需拔取病发，呼吸道感染取痰液等。以皮肤标本为例，需刮取病变边缘活跃部位的皮屑，毛发则拔取带有真菌菌丝的病发。
2.操作方法：将标本置于载玻片上，加入10%-20%氢氧化钾溶液，加盖玻片后镜检，氢氧化钾可溶解角质等杂质，便于观察菌丝或孢子。通过显微镜观察是否存在真菌的菌丝或孢子，能快速提供初步诊断线索，但无法确定真菌种类。
二、真菌培养
1.标本接种：将采集的标本接种于沙保弱培养基等真菌专用培养基上，不同标本类型有不同接种要求，如痰液标本需先进行处理以减少杂菌干扰。
2.培养观察：将接种后的培养基置于适宜温度（一般25-30℃）培养，通常3-7天可观察到菌落生长，通过观察菌落的形态、颜色、质地等特征初步判断真菌种类，培养时间可能因真菌种类而异，有时需数周才能明确结果。
三、组织病理学检查
1.标本获取：通过活检获取病变组织，如深部组织感染需进行手术活检等。
2.病理切片与染色：将组织制成病理切片，常用HE染色、PAS染色等，PAS染色可清晰显示真菌的菌丝和孢子，在组织内观察其形态、分布等，从而判断感染的深度和真菌类型，对深部真菌感染的诊断具有重要价值。
四、血清学检查
1.抗原检测：例如半乳甘露聚糖试验用于检测曲霉菌感染，可在血液中检测到曲霉菌的半乳甘露聚糖抗原，对侵袭性曲霉菌病有辅助诊断意义；1，3-β-D-葡聚糖试验可检测多种真菌的细胞壁成分，对侵袭性真菌感染有一定提示作用，但存在假阳性（如使用含该物质的透析液、静脉注射免疫球蛋白等情况）和假阴性（如感染早期或真菌量少等）情况，需结合临床综合判断。
2.抗体检测：检测真菌抗体，如隐球菌抗体等，但抗体检测受感染时间、机体免疫状态等影响，单一抗体阳性需结合临床症状等综合分析。
五、分子生物学检查
1.PCR技术：利用聚合酶链式反应扩增真菌的特异性DNA片段，能快速、特异性检测真菌，灵敏度和特异性较高，可用于检测难以培养或培养时间长的真菌，但对实验室设备和技术要求较高，且可能存在污染导致假阳性等问题。
特殊人群注意事项
儿童：儿童免疫系统发育不完善，标本采集时需注重舒适性和安全性，如痰液采集需耐心引导，避免过度哭闹导致标本采集不规范；组织活检等操作需充分评估风险，选择合适的检查时机，优先考虑对儿童损伤小的检查方法。
老年人：老年人常合并多种基础疾病，如凝血功能异常等，进行组织活检等检查时需评估凝血功能等身体状况，选择合适的检查方式，避免因基础疾病影响检查过程及结果。
妊娠期女性：进行真菌感染检查时需权衡检查对胎儿的影响，优先选择对胎儿影响小的检查手段，如非侵入性的标本采集方法等，避免使用可能对胎儿有潜在风险的检查方式。
长期使用免疫抑制剂者：此类人群易发生真菌感染，检查时需重点关注相关标本的检测，如血液、深部组织等标本的检测要及时准确，以便早期发现真菌感染并进行干预。
