25-羟维生素D是维生素D在体内的主要循环储存形式，由肝脏将维生素D前体（包括皮肤经紫外线照射生成的胆钙化醇及食物来源的维生素D3）转化而来，其血清浓度可稳定反映机体长期维生素D营养状态，是临床诊断维生素D缺乏或不足的核心检测指标。25-羟维生素D的半衰期约15天，较活性形式1，25-二羟维生素D（半衰期仅4-6小时）更稳定，检测准确性更高，因此被广泛作为维生素D营养评估的“金标准”。
维生素D的核心生理功能是调节钙磷代谢，25-羟维生素D通过促进肾脏重吸收钙、肠道吸收钙，维持血清钙浓度稳定，进而保障骨骼健康，预防儿童佝偻病、成人骨软化症及骨质疏松症。近年研究发现，其受体广泛分布于免疫细胞、心血管系统等组织，可能参与免疫调节（如抑制自身免疫反应）、心血管保护（改善血管内皮功能）及神经功能维持（调节神经递质合成），但上述作用需更多临床研究证实，当前明确的功能仍以骨骼健康为主。
血清25-羟维生素D的参考范围存在年龄、性别差异，健康成人一般为20-50ng/ml（50-125nmol/L）；低于20ng/ml提示维生素D不足，低于12ng/ml（30nmol/L）为缺乏。检测25-羟维生素D可用于早期筛查骨代谢异常（如骨折风险评估）、指导慢性肾病等患者的营养支持，对糖尿病、高血压等慢性病的风险关联研究也有参考价值。
25-羟维生素D的来源包括内源性和外源性：内源性依赖皮肤经紫外线B段（UVB，波长290-320nm）照射合成，每日暴露于阳光下10-15分钟（面部、手臂等裸露部位）可满足需求，但受年龄（婴幼儿皮肤娇嫩、老年人合成效率下降）、肤色（深色皮肤黑色素抑制UVB穿透）、季节（北纬35°以北地区冬季日照不足）及生活方式（长期室内工作、使用高倍数防晒霜）影响显著。外源性来源包括食物（如深海鱼类、蛋黄、强化乳制品）及维生素D补充剂，素食者或严格限食人群需优先通过补剂满足需求。
特殊人群需重点关注25-羟维生素D水平：婴幼儿6月龄内纯母乳喂养时，因母乳中维生素D含量极低（约10-20IU/L），需每日补充维生素D400IU，避免佝偻病；老年人因皮肤合成能力下降、活动减少，跌倒及骨质疏松风险高，建议每年检测1次，必要时每日补充800-1000IU维生素D；孕妇及哺乳期女性需维持血清浓度30-50ng/ml（75-125nmol/L），预防胎儿骨骼发育异常及自身骨流失；慢性肝病、肾病患者因肝脏转化或肾脏活化功能受损，需在医生指导下定期监测并调整补充方案。
