血液学检查包含白细胞计数及分类,原理是用血液分析仪或显微镜观察白细胞数量及各类比例,意义是其异常变化可提示免疫功能紊乱且不同年龄阶段正常范围有差异;体液免疫功能检查包括免疫球蛋白测定,原理是用免疫比浊等方法检测血清中IgG、IgA、IgM含量,意义是其水平异常与体液免疫功能缺陷、慢性感染、自身免疫性疾病等有关且不同年龄阶段水平不同,还有B细胞亚群检测,原理是用流式细胞术检测外周血中B细胞数量及比例,意义是反映体液免疫功能状态且不同人群正常范围有差异;细胞免疫功能检查有T细胞亚群检测,原理是用流式细胞术检测T细胞及其亚群数量和比例,意义是CD4/CD8比值等可评估细胞免疫功能且不同年龄阶段正常范围不同,还有淋巴细胞增殖试验,原理是体外培养淋巴细胞用有丝分裂原或特异性抗原刺激观察增殖情况,意义是反映淋巴细胞活化和增殖能力评估细胞免疫功能且不同个体因因素有差异;吞噬细胞功能检查包含中性粒细胞吞噬功能测定,原理是体外吞噬实验观察中性粒细胞吞噬细菌能力,意义是其功能异常可致抵御细菌感染能力下降且不同人群正常范围不同,还有巨噬细胞功能测定,原理是通过检测巨噬细胞对靶细胞杀伤能力等评估功能,意义是其功能异常影响免疫防御和调节等过程且不同年龄阶段功能不同。
一、血液学检查
(一)白细胞计数及分类
1.原理:通过血液分析仪或显微镜观察血液中白细胞的数量及不同类型白细胞(中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)的比例。
2.意义:白细胞是免疫系统的重要组成部分,不同类型白细胞在免疫应答中发挥不同作用。例如,中性粒细胞是抵御细菌感染的重要防线;淋巴细胞中的T细胞和B细胞分别参与细胞免疫和体液免疫。一般来说,白细胞总数及分类的异常变化可能提示机体免疫功能的紊乱,如白细胞总数显著升高伴中性粒细胞比例增高常见于细菌感染引起的免疫反应增强,而淋巴细胞比例异常改变可能与病毒感染等相关。不同年龄阶段白细胞计数及分类正常范围有所差异,儿童的白细胞计数通常高于成人,随着年龄增长逐渐接近成人水平。
二、体液免疫功能检查
(一)免疫球蛋白测定
1.IgG、IgA、IgM
原理:采用免疫比浊等方法检测血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)的含量。
意义:IgG是血清中主要的免疫球蛋白,参与再次免疫应答和抗感染;IgA分为血清型和分泌型,分泌型IgA在黏膜局部免疫中起重要作用;IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体。不同年龄阶段免疫球蛋白水平不同,新生儿的IgM含量较低,出生后逐渐升高,IgG可通过胎盘从母体获得,出生后含量逐渐增加,而IgA则在出生后一段时间内含量较低,随年龄增长逐渐达到成人水平。例如,免疫球蛋白水平降低可能提示体液免疫功能缺陷,如常见的X连锁无丙种球蛋白血症患者血清中IgG、IgA、IgM均显著降低;而免疫球蛋白水平升高可能与慢性感染、自身免疫性疾病等有关。
(二)B细胞亚群检测
1.原理:利用流式细胞术,通过特异性的荧光标记抗体检测外周血中B细胞的数量及比例。
2.意义:B细胞是体液免疫的关键细胞,B细胞亚群的变化反映体液免疫功能状态。例如,B细胞数量减少或功能异常可能导致抗体产生不足,影响机体的体液免疫能力。不同人群B细胞亚群正常范围有差异,在儿童时期,B细胞的发育和功能也在不断完善过程中,与成人相比可能存在一定差异。
三、细胞免疫功能检查
(一)T细胞亚群检测
1.原理:同样通过流式细胞术,使用特异性荧光抗体标记T细胞表面的不同标志物(如CD3、CD4、CD8等),从而检测T细胞及其亚群(CD3T细胞、CD4T细胞、CD8T细胞等)的数量和比例。
2.意义:CD4T细胞是辅助性T细胞,在免疫调节中起关键作用;CD8T细胞是细胞毒性T细胞,参与细胞免疫应答。CD4/CD8比值是评估细胞免疫功能的重要指标,正常情况下该比值有一定范围,当比值异常改变时,可能提示免疫功能紊乱,如艾滋病患者体内CD4T细胞数量显著减少,CD4/CD8比值降低。不同年龄阶段T细胞亚群的正常范围不同,儿童的T细胞免疫功能尚未完全发育成熟,与成人相比,CD4T细胞比例相对较高,随着年龄增长逐渐调整至成人范围。
(二)淋巴细胞增殖试验
1.原理:体外培养淋巴细胞,用有丝分裂原(如植物血凝素PHA、刀豆蛋白ConA等)或特异性抗原刺激淋巴细胞,观察淋巴细胞的增殖情况。
2.意义:淋巴细胞增殖试验反映淋巴细胞的活化和增殖能力,从而评估细胞免疫功能。例如,增殖能力下降可能提示细胞免疫功能低下,常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤晚期等情况。不同个体因年龄、健康状况等因素,淋巴细胞增殖的程度有所差异,儿童由于免疫系统处于发育阶段,其淋巴细胞对刺激的增殖反应与成人可能不同,一般来说儿童的淋巴细胞增殖能力在一定范围内,但也会随着年龄增长而逐渐稳定和完善。
四、吞噬细胞功能检查
(一)中性粒细胞吞噬功能测定
1.原理:采用体外吞噬实验,如将中性粒细胞与金黄色葡萄球菌等细菌共同培养,然后观察中性粒细胞吞噬细菌的能力。
2.意义:中性粒细胞的吞噬功能是机体非特异性免疫的重要环节,吞噬功能异常可能导致机体抵御细菌感染的能力下降。不同人群中性粒细胞吞噬功能正常范围不同,儿童的中性粒细胞吞噬功能在生长发育过程中逐渐完善,新生儿的吞噬功能相对较弱,随着月龄增加逐渐增强。例如,慢性肉芽肿病患者存在中性粒细胞吞噬功能缺陷,容易反复发生细菌感染。
(二)巨噬细胞功能测定
1.原理:可以通过检测巨噬细胞对肿瘤细胞或其他靶细胞的杀伤能力,或检测巨噬细胞分泌细胞因子等功能来评估其功能。例如,采用巨噬细胞杀伤实验,观察巨噬细胞对靶细胞的杀伤率。
2.意义:巨噬细胞在免疫应答中参与抗原呈递、吞噬病原体等多种功能,其功能异常可能影响机体的免疫防御和免疫调节等过程。不同年龄阶段巨噬细胞功能有所不同,儿童的巨噬细胞功能随年龄增长而逐渐成熟,在婴幼儿时期巨噬细胞的一些功能可能相对较弱,随着年龄增加逐渐达到较好的功能状态。