化疗是治疗癌症重要手段但有不适反应，无绝对哪次最痛苦，与化疗药物种类、剂量及患者年龄、身体状况、心理状态等相关，初始阶段因不了解有焦虑及轻度反应，多次用药可能适应部分反应，严重不良反应时也痛苦，医护会采措施减轻。
药物种类：不同的化疗药物引起的不良反应程度不同。例如，一些铂类药物（如顺铂）导致恶心、呕吐等胃肠道反应相对较重的情况可能在用药后较为明显阶段让患者感觉痛苦；而有些抗代谢类药物可能引起骨髓抑制的时间和程度有差异，骨髓抑制会导致患者出现乏力、感染风险增加等不适，也会让患者感觉难受。
药物剂量：化疗药物剂量越高，通常不良反应发生的可能性越大且程度可能越重。比如大剂量化疗时，患者出现严重骨髓抑制、剧烈呕吐等情况的概率增加，会让患者感觉更痛苦。
与患者个体相关因素
年龄：老年患者身体机能相对较弱，对化疗药物的耐受性可能不如年轻患者。例如老年患者可能在化疗后更容易出现严重的骨髓抑制，恢复时间更长，导致乏力等不适持续时间较久，让患者感觉更痛苦；而儿童患者由于身体处于生长发育阶段，化疗带来的不良反应对其身体发育等方面的影响以及自身的耐受情况也有其特殊性，可能会面临如生长发育受影响等问题带来的身心痛苦。
身体状况：如果患者在化疗前本身身体状况较差，比如存在贫血、营养不良等情况，那么在化疗过程中更容易出现诸如乏力加重、抵抗力下降更明显等情况，会感觉更痛苦。例如本身就有重度贫血的患者，在化疗后骨髓抑制导致红细胞生成进一步减少，贫血症状加重，会明显感到乏力、气短等不适。
心理状态：心理压力大、焦虑程度高的患者对化疗不良反应的感受可能更敏感。比如有的患者过于担忧化疗带来的痛苦，在化疗过程中即使出现相对较轻的不良反应也会放大这种痛苦感觉。
一般来说，在化疗的初始阶段，患者可能会因为对化疗的不了解而存在焦虑情绪，加上可能出现的轻度不良反应，如轻度恶心、呕吐等，会有一定的不适；而在化疗过程中随着多次用药，患者可能会逐渐适应部分不良反应，但如果出现较为严重的骨髓抑制、严重的胃肠道反应等情况时也会很痛苦。总体而言，不能简单判定第几次化疗最痛苦，而是要综合患者自身情况和化疗药物等多方面因素来具体分析，在化疗过程中医护人员会采取相应措施来减轻患者的痛苦，如使用止吐药物、升血细胞药物等来缓解不良反应。
