检测前准备包括样本采集（静脉采血无菌操作、指尖采血消毒等及儿童采血要求）和试剂准备（检查试剂盒有效期外观等并按说明操作）；具体操作步骤有按要求加样、温育、多次洗涤、加酶标试剂、再次温育、再次洗涤、加底物显色、终止反应、用酶标仪依据临界值等判定结果；特殊人群注意事项为儿童采血需安抚防溶血等，孕妇样本采集动作轻柔且结果解读考虑生理状态，有基础病史人群需询问病史并注意样本处理特殊性以准确定果。
一、检测前准备
1.样本采集：通常采用静脉采血或指尖采血方式。静脉采血需严格执行无菌操作，防止样本污染；指尖采血时需对手指充分消毒，保证采血部位暴露充分以获取足量血液，儿童采血需轻柔操作，避免因哭闹影响样本采集。
2.试剂准备：检查ELISA艾滋病抗体检测试剂盒的有效期与外观，确保试剂在有效期内且包装无破损，使用前需仔细阅读说明书明确操作要求，不同批次试剂操作需保持一致。
二、具体操作步骤
1.加样：按试剂盒要求将采集样本准确加入相应反应孔，注意加样量符合试剂规定，不同样本类型（血清、血浆等）加样要求有别，需严格区分。
2.温育：将加样后的反应板置于37℃恒温箱中温育，温育时间严格遵循试剂盒说明书，温度波动会影响反应效果，儿童温育时需保障恒温箱环境稳定。
3.洗涤：利用洗涤液多次洗涤反应孔，去除未结合物质，洗涤次数与洗涤液用量需符合试剂盒要求，洗涤不充分会致背景值升高影响结果判定。
4.加酶标试剂：按规定准确加入酶标试剂，保证加样量准确，酶标试剂活性影响反应进程，需在适宜条件下保存使用。
5.再次温育：将反应板再次放入恒温箱温育，时间与温度要求同前次温育，温育中需避免反应板受震动等干扰。
6.再次洗涤：重复洗涤步骤，确保反应孔内物质充分清洗干净。
7.加底物显色：加入底物溶液并在规定条件下发生显色反应，底物种类与显色时间影响结果观察，需严格把控。
8.终止反应：准确加入终止液终止显色反应，控制终止液加入量与时间。
9.结果判定：使用酶标仪读取吸光度值，依据试剂盒提供的临界值或计算公式判定结果为阳性、阴性或可疑，不同年龄人群正常参考值范围有差异，需结合实际情况判定。
三、特殊人群注意事项
1.儿童：采血时需安抚儿童情绪，避免因哭闹致样本溶血等影响检测结果，采血后压迫止血时间要适当，防止局部淤血。
2.孕妇：样本采集过程中动作需轻柔，检测结果解读时要考虑孕妇生理状态对抗体水平的可能影响，必要时需结合其他检查综合判断。
3.有基础病史人群：若患者存在免疫系统相关疾病等基础病史，可能影响抗体检测结果，检测前需详细询问病史，检测时需注意样本处理的特殊性，确保结果尽可能准确反映实际感染情况。
