佝偻病的确诊需结合病史、临床表现、实验室检查及影像学特征综合判断，其中血清25-羟维生素D水平检测是核心诊断依据。
一、病史采集与临床表现评估：1. 高危人群特征：婴幼儿（尤其是6个月以下）、早产儿、低出生体重儿为高发群体，存在日照不足（每日户外活动<2小时）、母乳喂养未及时添加维生素D、辅食中钙/维生素D摄入不足等情况；有慢性腹泻、肝胆疾病等影响维生素D吸收或代谢的病史。2. 骨骼体征：不同月龄儿童表现不同，3-6个月婴儿可出现颅骨软化（按压顶枕部有乒乓球感），7-8个月以上出现方颅（额骨/顶骨中心增厚隆起），1岁后儿童可见肋骨串珠（肋软骨交界处隆起）、手镯/脚镯征（腕踝部骨骺处增厚），严重时出现鸡胸（肋软骨区凹陷）、O型腿/X型腿（1岁后站立行走儿童因骨骼承重变形）；非特异性症状包括睡眠不安、易惊、夜啼、多汗（与室温无关）、肌肉松弛等。
二、实验室检查：1. 血清25-羟维生素D水平：是诊断维生素D缺乏的金标准，参考值范围为20-50 ng/mL，<20 ng/mL提示维生素D不足，<12 ng/mL提示维生素D缺乏，可区分不同严重程度。2. 血生化指标：血钙正常或轻度降低，血磷显著降低，碱性磷酸酶（ALP）升高（因骨基质合成增加），甲状旁腺激素（PTH）代偿性升高（维持血钙正常，但加重骨骼脱钙）。3. 骨代谢标志物：Ⅰ型前胶原氨基端延长肽（P1NP）、β-CTX等指标可反映骨形成与骨吸收情况，辅助判断病情活动度，适用于复杂病例评估。
三、影像学检查：1. X线长骨片：典型表现为骨骺端增宽（临时钙化带增宽）、临时钙化带模糊/消失，骨骺软骨带增宽（>2 mm），骨干弯曲变形（如“O”形腿）；腕骨骨化中心出现延迟（6个月婴儿正常应出现2-3个，未出现提示骨成熟障碍）。2. 骨密度检测：定量超声或双能X线骨密度仪显示骨密度降低，可作为辅助诊断依据，但需结合临床。
四、鉴别诊断：1. 其他骨骼发育障碍：如软骨发育不全（四肢短粗、比例异常，智力发育正常，血钙血磷正常）、甲状腺功能减退（TSH升高，生长迟缓，骨龄显著延迟）。2. 低磷性抗维生素D佝偻病：血磷<0.8 mmol/L，25-羟维生素D正常，对生理剂量维生素D治疗反应差。
五、特殊人群注意事项：1. 早产儿：出生后48小时内开始补充维生素D，每日800 IU，3个月后改为400 IU直至2岁，母乳喂养婴儿若日照不足（每日户外活动<1小时），需持续补充维生素D制剂。2. 慢性疾病患儿：如慢性腹泻、肝胆疾病患儿，因维生素D吸收/代谢受影响，建议每1-3个月监测血清25-羟维生素D水平，及时调整补充剂量；合并严重营养不良儿童需优先改善营养状态，再进行佝偻病干预。
