免疫组化检查是应用免疫学抗原与抗体特异性结合原理，通过显色确定组织细胞内抗原进行定位定性定量研究的技术，原理是利用抗原抗体特异性结合特性，步骤包括标本处理、抗原修复、加一抗、加二抗、显色，应用于肿瘤诊断鉴别及病理研究，不同人群检查有注意事项，儿童需家长安抚协助且操作轻柔，老年人要评估身体状况及关注检查后反应，特殊病史人群要告知过敏史等并谨慎操作。
一、免疫组化检查的定义
免疫组化检查是应用免疫学抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
二、免疫组化检查的原理
利用抗原与抗体特异性结合的特性，将已知抗体标记上显色剂，然后与组织或细胞中的抗原反应，抗原抗体结合后，通过显色剂的颜色反应来确定抗原的存在与否及含量等情况。例如，当组织中存在某种特定的蛋白质抗原时，标记了显色剂的相应抗体就会与之结合，通过观察显色剂的显色部位和强度来判断该抗原的相关信息。
三、免疫组化检查的步骤
1.标本处理：
对于手术切除的组织标本，需要进行固定，常用的固定液有甲醛等，固定的目的是保持组织细胞的形态结构以及抗原的稳定性。
然后将固定好的组织进行切片，切成薄的切片以便于后续操作。
2.抗原修复：
由于甲醛固定等过程可能会使抗原表位被封闭等，所以需要进行抗原修复步骤。有微波修复、高压修复等方法，通过一定的处理使抗原表位重新暴露出来，便于抗体与之结合。
3.加一抗：
将标记好的特异性抗体（一抗）加入到切片上，一抗与组织细胞中的抗原特异性结合。
4.加二抗：
如果一抗是未标记的，此时需要加入标记了显色剂等的二抗，二抗能够与一抗特异性结合，从而将信号放大等。
5.显色：
根据使用的显色剂不同进行相应的显色操作，例如酶标记的二抗可以通过加入酶的底物来产生显色反应，荧光标记的二抗则可以通过荧光显微镜观察荧光等。
四、免疫组化检查的应用领域
1.肿瘤诊断与鉴别诊断
判断肿瘤的来源：例如，对于一些形态学上难以区分的转移性肿瘤，通过免疫组化可以判断其是来源于上皮组织、间叶组织等。比如，上皮源性肿瘤常表达角蛋白等标记物，间叶源性肿瘤常表达波形蛋白等标记物。
肿瘤的分型：在乳腺癌中，可以通过免疫组化检测雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER-2）等指标来进行分子分型，不同分型的乳腺癌治疗方案和预后不同。
2.病理研究
在基础病理研究中，用于研究各种疾病状态下组织细胞内蛋白质的表达变化等情况，有助于深入了解疾病的发生发展机制。例如研究某些炎症性疾病中特定炎症相关蛋白的表达情况等。
五、不同人群进行免疫组化检查的注意事项
1.儿童
儿童进行免疫组化检查时，需要家长充分理解检查的必要性和过程。在标本采集过程中，儿童可能会因为恐惧等情绪不配合，家长要给予安抚，协助医护人员完成标本采集等操作。儿童的组织标本处理等步骤与成人类似，但要注意操作的轻柔，避免对儿童组织造成额外损伤。
2.老年人
老年人进行免疫组化检查时，要考虑其身体基础状况。一些老年人可能合并有多种基础疾病，在标本采集前要评估其身体能否耐受标本采集过程。例如，对于行动不便或有严重心肺疾病的老年人，标本采集过程中要注意避免过度劳累等情况。在检查后，要关注老年人的身体反应，因为老年人的身体恢复相对较慢等。
3.特殊病史人群
对于有过敏史的人群，要提前告知医护人员，因为免疫组化检查中使用的抗体等可能存在引起过敏的风险。如果有自身免疫性疾病病史的人群，在进行免疫组化检查时，要考虑到免疫状态对检查结果的可能影响，同时医护人员要谨慎操作，密切观察检查过程中的反应等。
