酶联免疫法全称为酶联免疫吸附测定法,其英文缩写是ELISA,这是一种酶标记测定手段,能够用于检测大分子抗原以及特异性抗体等,属于一种具备高敏感性、强特异性、良好重复性的定量实验诊断方法。
一、原理:
1.聚苯乙烯板上已包被的固相抗原或抗体与过量待检测的抗体或抗原发生反应,其中一部分会结合形成固相抗原抗体复合物,另一部分则是多余的游离抗体或抗原。
2.通过洗板操作,保留固相抗原抗体复合物,洗去多余的游离抗体或抗原,接着加入酶标记的抗体,进而形成固相抗原抗体酶标记抗体复合物。
3.洗去多余酶标抗体后加入底物,此时酶会催化底物显色,颜色的深浅与待测的抗体或抗原含量成正相关或负相关。
二、应用:
1.现已成功应用于多种由病原微生物所引发的传染病、寄生虫病以及非传染病等各方面的免疫诊断。
2.也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,例如检测结核抗体、EB病毒抗体、HIV抗体、乙肝病毒抗原、破伤风抗毒素、流感病毒的抗原、梅毒抗体等。
尽管酶联免疫法应用广泛,但也存在一定局限性,其手工操作步骤较为繁琐,而且受影响因素多,容易出现假阳性结果等,所以有很多项目已被兴起的化学发光法所取代。
尾段总结:酶联免疫法是一种重要的实验诊断方法,原理包括一系列反应和复合物的形成,应用广泛但有局限性。