男性检查支原体衣原体主要通过采集尿道或生殖道分泌物、尿液、精液或前列腺液样本，采用核酸检测（NAATs）或培养法确诊，具体方式依症状和感染场景而定。
尿道分泌物样本检测适用于尿道分泌物、排尿不适等症状者。由医护人员用无菌拭子插入尿道3-5cm蘸取分泌物，采用核酸检测（敏感性90%以上）或培养法。采集前24小时避免性生活及排尿，减少干扰。
尿液样本检测适用于有高危性行为史、性伴侣感染史或特殊职业（如男性同性性行为者）者。采集清洁中段尿（消毒尿道口后留取），采用核酸扩增检测，简便且隐私性高。留尿前避免大量饮水，清晨首次尿更佳。
精液样本检测适用于性伴侣感染、不育或生殖道感染排查者。手淫或器具采集精液，冷藏送检，可查衣原体、支原体及其他病原体。禁欲2-7天，避免药物、酒精干扰。
前列腺液样本检测适用于慢性前列腺炎或治疗后复查者。医生肛门指检按摩前列腺收集液体，检测同尿道样本。老年男性或前列腺增生者操作中可能不适，需提前告知病史。
特殊人群需注意：青少年因隐私敏感，建议家长陪同并提前沟通；糖尿病或免疫低下者采集样本后需密切观察局部反应；备孕男性若精液异常，需在治疗期间严格禁欲，避免影响检测准确性。
