腰穿即腰椎穿刺，所涉及的层次主要有皮肤、皮下组织、棘上韧带、棘间韧带、黄韧带，不同年龄段人群各层次有不同特点，儿童操作需更注意相关情况。
皮肤层
皮肤是人体的外层保护结构，由表皮和真皮组成，具有一定的厚度和韧性，是腰穿首先要穿透的层次。不同年龄人群的皮肤厚度会有所差异，儿童皮肤相对较薄，操作时需更加轻柔，避免造成不必要的损伤。
皮下组织层
皮下组织位于皮肤下方，由疏松结缔组织和脂肪组织构成，其中含有血管和神经等结构。成年人的皮下脂肪厚度因个体的营养状况等因素有所不同，肥胖者皮下组织相对较厚，操作时进针深度会相应增加。
棘上韧带层
棘上韧带是连接各椎骨棘突尖的纵行韧带，由弹性纤维构成。不同年龄段人群的棘上韧带弹性和韧性有一定差别，老年人的棘上韧带可能因退变而变得相对脆弱，在穿刺过程中需注意操作力度。
棘间韧带层
棘间韧带位于相邻棘突之间，也是腰穿要经过的层次，其结构特点在不同个体间存在一定变异，在穿刺时需要平稳推进穿刺针以通过该层次。
黄韧带层
黄韧带连接相邻椎弓板，由黄色的弹性纤维组成，是腰穿时需要重点突破的一层，当穿刺针穿过黄韧带时会有明显的“落空感”，这是腰穿的重要标志性感觉。在儿童进行腰穿时，由于其脊柱结构尚未完全发育成熟，黄韧带等结构相对较薄且有其自身的解剖特点，操作时更要精准把控进针深度和力度，以确保安全顺利进行穿刺操作。
