强直性脊柱炎可通过临床表现评估，有下腰背痛等症状且不同年龄性别表现有差异；影像学检查中X线早期可能无异常，进展后有相应改变，CT更敏感，MRI利于早期诊断；实验室检查中HLA-B27阳性率高但非绝对患病，炎性标志物常升高；诊断常用修订纽约标准，需综合多方面结合个体差异及家族史等进行诊断。
影像学检查
X线检查：早期可能无明显异常，随着病情进展，可见骶髂关节面模糊、硬化，关节间隙狭窄等改变，晚期可出现骶髂关节融合，脊柱呈“竹节样”改变。不同年龄患者X线表现可能有差异，儿童患者骶髂关节X线改变相对不典型，需结合其他检查综合判断。
CT检查：对于骶髂关节病变的诊断比X线更敏感，能更早发现骶髂关节的细微变化，如关节面的侵蚀、破坏等情况。在评估病情严重程度及病变范围方面有重要价值，不同性别患者CT表现差异不大，但年龄较小患者要注意辐射防护。
磁共振成像（MRI）检查：早期就能发现骶髂关节骨髓水肿、滑膜炎症等病变，对强直性脊柱炎的早期诊断意义重大。尤其是对于临床高度怀疑但常规影像学检查未发现明显异常的患者，MRI有助于更早明确诊断。不同年龄患者MRI表现需专业医师结合临床综合分析。
实验室检查
人类白细胞抗原B27（HLA-B27）检测：HLA-B27阳性在强直性脊柱炎患者中的阳性率较高，但并非所有阳性者都会患病，只是阳性患者患强直性脊柱炎的风险相对增加。不同种族、年龄、性别患者HLA-B27阳性率有一定差异，比如高加索人种中HLA-B27阳性率相对较高，而在儿童患者中HLA-B27阳性也需结合临床及其他检查判断。
炎性标志物检查：红细胞沉降率（ESR）和C-反应蛋白（CRP）常升高，提示体内存在炎症反应。不过这些指标升高也可见于其他炎性疾病，需结合临床综合判断。不同年龄患者炎性标志物变化可能受生长发育等因素影响，女性在生理期等特殊时期CRP可能有生理性升高，需注意鉴别。
诊断标准应用
目前常用的诊断标准是修订的纽约标准，主要依据临床症状、影像学检查以及HLA-B27等综合判断。比如患者符合临床标准中炎性腰背痛，同时影像学检查提示骶髂关节炎，再结合HLA-B27等情况可辅助确诊。在不同年龄、性别患者诊断时要灵活运用该标准，充分考虑个体差异，对于有相关病史的患者要详细追溯病史及家族史情况，家族中有强直性脊柱炎患者的个体患病风险相对更高，需密切观察相关表现并及时进行检查评估。
