病毒性心肌炎的诊断依据包括临床诊断依据（前驱感染史、心脏相关症状，以及体格检查发现的心率心律异常、心脏扩大、心力衰竭体征等）、辅助检查依据（心电图的ST-T改变、心律失常，心肌损伤标志物的CK-MB、心肌肌钙蛋白升高，超声心动图的心室功能异常、心肌结构改变，病毒学检查的病毒核酸检测和抗体检测），确诊需心内膜心肌活检有病毒浸润等病理证据，无此条件时符合相应指标组合可临床诊断。
一、临床诊断依据
（一）病史与症状
1.前驱感染史：发病前1-3周常有病毒感染前驱症状，如发热、全身倦怠感即所谓“感冒”样症状或恶心、呕吐等消化道症状，然后出现心悸、胸痛、呼吸困难、水肿甚至Adams-Stokes综合征等表现。不同年龄人群前驱感染表现可能有差异，儿童可能以消化道症状更为突出，成人则感冒样症状相对常见。
2.心脏相关症状：患者可有心悸、胸闷、胸痛等，病情较重者可出现心力衰竭相关症状，如呼吸困难、水肿等，对于有基础心脏疾病或特殊病史的患者，病毒性心肌炎可能导致原有病情加重。
（二）体格检查
1.心率和心律异常：可发现心动过速、心动过缓，听诊可闻及期前收缩、传导阻滞等心律失常表现。不同年龄组心律失常特点可能有别，儿童心律失常类型相对多样，成人也可出现各种类型心律失常。
2.心脏扩大：病情较重时可触及心界扩大，尤其是全心扩大时心界向两侧扩大，对于有特殊病史如先天性心脏病史的患者，病毒性心肌炎可能诱发心脏扩大加重。
3.心力衰竭体征：出现心力衰竭时可闻及肺部湿性啰音，下肢可出现水肿等右心衰竭体征，在老年患者中，本身可能存在心功能减退基础，病毒性心肌炎更易诱发明显心力衰竭表现。
二、辅助检查依据
（一）心电图检查
1.ST-T改变：常见ST段压低、T波低平或倒置等改变，不同导联ST-T改变可能提示心肌受累部位不同。例如，V1-V6导联ST-T改变可能提示广泛心肌损伤，对于有特殊生活方式如长期熬夜、吸烟的人群，心电图改变可能受这些因素干扰，需结合临床综合判断。
2.心律失常：可出现各种心律失常，如室性期前收缩呈二联律、三联律，房性期前收缩，房室传导阻滞等。不同年龄心律失常的临床意义有所不同，儿童出现严重心律失常可能提示病情较重，需要更密切监测。
（二）心肌损伤标志物检查
1.肌酸激酶同工酶（CK-MB）：血清CK-MB升高，其升高程度可反映心肌损伤程度。一般来说，CK-MB升高提示心肌细胞受损，在发病早期即可升高，对于有基础代谢异常如甲状腺功能亢进的患者，CK-MB升高可能需要排除其他干扰因素。
2.心肌肌钙蛋白（cTnI或cTnT）：cTnI或cTnT升高是诊断心肌损伤的重要指标，其特异性较高。不同年龄人群cTnI或cTnT的正常参考值有差异，儿童的正常参考值与成人不同，在评估儿童病毒性心肌炎时需注意参考儿童的正常范围。
（三）超声心动图检查
1.心室功能异常：可发现左心室或双心室收缩功能减退，射血分数降低等。对于有先天性心脏病病史的患儿，超声心动图可帮助判断病毒性心肌炎是否导致心脏结构和功能进一步异常。
2.心肌结构改变：部分患者可出现心肌厚度改变、心肌回声不均匀等，有助于评估心肌病变情况。在老年患者中，超声心动图可观察心脏结构和功能随病毒性心肌炎的变化，为治疗提供依据。
（四）病毒学检查
1.病毒核酸检测：采用PCR等方法检测心肌、血液或粪便等标本中的病毒核酸，可明确是否有病毒感染。不同病毒检测方法有其特异性和敏感性，对于有特殊生活方式如经常接触野生动物的人群，需考虑病毒感染的特殊来源。
2.病毒抗体检测：急性期和恢复期血清中的同型病毒抗体滴度有4倍及以上升高，或单次抗体滴度显著增高（如柯萨奇B组病毒中和抗体≥1：640或其他病毒中和抗体≥1：320），或特异性IgM≥1：320（按不同实验室标准），提示近期病毒感染。对于有基础免疫疾病的患者，病毒抗体检测结果可能出现假阳性或假阴性，需结合临床综合分析。
三、确诊依据
在具备上述临床诊断依据和辅助检查依据的基础上，心内膜心肌活检（EMB）发现心肌组织内有病毒浸润等病毒性心肌炎的病理证据可确诊，但心内膜心肌活检是有创检查，需严格掌握适应证，对于无明显禁忌证且高度怀疑病毒性心肌炎的患者可考虑进行，尤其在鉴别诊断困难时。对于无心内膜心肌活检条件的情况，符合临床诊断依据中主要指标2项及以上，或主要指标1项加次要指标2项及以上（其中基本指标至少1项）者可临床诊断为病毒性心肌炎。主要指标包括：急、慢性心功能不全或心脑综合征；有ST-T改变、房室传导阻滞或束支传导阻滞；心肌肌钙蛋白阳性等。次要指标包括：发病同时或1-3周前有病毒感染史；有发热、乏力、多汗、心悸、胸闷、气短、头晕、心前区不适、手足凉、肌肉酸痛等症状至少2项；心尖区第一心音明显低钝，或安静时心动过速；心电图有轻度异常；病程早期血清CK-MB、肌钙蛋白增高。
