中耳炎的诊断涉及病史采集、耳部检查、听力检查和影像学检查。病史采集需关注年龄因素及近期上呼吸道感染史等；耳部检查包括耳镜检查及必要时的鼓膜穿刺或切开检查；听力检查有纯音测听和声导抗测试；影像学检查常用颞骨CT，怀疑有并发症或病情复杂时考虑，儿童做CT要注意辐射防护。
病史相关：要询问近期上呼吸道感染史，因为中耳炎常继发于上呼吸道感染，例如近期有感冒、鼻窦炎等病史，这增加了中耳炎的发生风险。还需了解有无耳部外伤史、过敏史等，过敏可能导致耳部黏膜水肿，增加中耳炎发生几率。
耳部检查
耳镜检查：通过耳镜可以直接观察鼓膜的情况。急性中耳炎时，鼓膜充血、肿胀，正常的鼓膜标志不清；分泌性中耳炎时，鼓膜可能呈琥珀色或灰白色，有的可见液平面。儿童进行耳镜检查时要注意轻柔操作，避免损伤儿童耳部黏膜。
鼓膜穿刺或切开检查（必要时）：对于一些不典型病例或病情较复杂的情况，可能需要进行鼓膜穿刺或切开检查，以获取中耳积液进行分析，明确积液的性质等，辅助诊断。
听力检查
纯音测听：适用于能配合测试的儿童，通过测试儿童对不同频率纯音的听阈，判断是否存在听力损失以及听力损失的程度。如果儿童患有中耳炎，可能会出现不同程度的传导性听力损失。例如，急性中耳炎时由于中耳腔积液等原因，声音传导受阻，纯音测听表现为气导降低，骨导正常或接近正常。
声导抗测试：是诊断中耳疾病的常用方法。分泌性中耳炎时，声导抗测试多显示为B型或C型曲线。B型曲线表示中耳腔呈密闭状态，无明显峰值；C型曲线表示鼓膜咽鼓管功能不良，负压状态。急性中耳炎早期声导抗可呈C型，随着病情发展可出现B型曲线。
影像学检查
颞骨CT：一般在怀疑有并发症或病情复杂难以诊断时考虑进行。颞骨CT可以清晰显示中耳腔、乳突等部位的结构，了解有无骨质破坏、积液等情况。例如，慢性化脓性中耳炎伴有乳突炎时，颞骨CT可显示乳突气房模糊、密度增高，甚至有骨质破坏等表现。但儿童进行CT检查时要注意辐射防护，尽量减少不必要的辐射暴露。
