强直性脊柱炎临床表现多样，早期有下腰部等疼痛僵硬且活动后缓解等特点，影像学检查中X线早期可能无明显异常，CT对骶髂关节病变诊断更敏感，MRI有助于早期精准诊断，实验室检查中HLA-B27阳性是重要遗传标记，炎症指标升高提示炎症反应，常用修订的纽约标准诊断，诊断时需考虑多因素综合判断。
影像学检查
X线检查：早期X线可能无明显异常，随着病情进展，可出现骶髂关节间隙模糊、变窄，椎体方形变，脊柱竹节样改变等典型表现。X线检查对于观察骨骼结构的形态变化有一定价值，但对于早期轻微病变的敏感度相对有限。
CT检查：CT对于骶髂关节病变的诊断比X线更敏感，能更早发现骶髂关节的细微炎症、骨质破坏等情况，有助于早期确诊强直性脊柱炎。例如能清晰显示骶髂关节面的侵蚀、硬化等改变。
磁共振成像（MRI）：MRI在强直性脊柱炎早期诊断中具有重要意义，可发现骶髂关节骨髓水肿、滑膜炎症等早期病变，比X线和CT更早检测到关节的炎症活动情况，对于早期精准确诊有很大帮助。不同年龄患者的MRI表现可能因骨骼发育等因素有一定差异，比如儿童患者的骨髓水肿表现可能与成人有所不同，但都能辅助诊断。
实验室检查
人类白细胞抗原B27（HLA-B27）：HLA-B27阳性在强直性脊柱炎患者中阳性率较高，但并非所有HLA-B27阳性者都会患强直性脊柱炎，只是HLA-B27阳性是强直性脊柱炎的一个重要遗传标记。不同性别、年龄人群的HLA-B27检测结果对于诊断有辅助作用，若HLA-B27阳性且伴有相应临床症状，需高度警惕强直性脊柱炎。
炎症指标：血沉（ESR）、C-反应蛋白（CRP）等炎症指标常升高，提示体内存在炎症反应。但炎症指标升高还可见于其他炎症性疾病，需结合临床症状和其他检查综合判断。年龄较小的患者炎症指标变化可能与成人有所不同，需要结合具体情况分析。
诊断标准
目前常用的是修订的纽约标准。该标准主要依据骶髂关节影像学改变和临床症状等进行诊断。符合双侧骶髂关节炎Ⅱ-Ⅳ级和（或）单侧骶髂关节炎Ⅲ-Ⅳ级，并伴有临床标准中至少1项（下腰背痛病史、腰椎活动受限、胸廓活动度低于相应年龄性别正常人），或者单纯双侧骶髂关节炎Ⅲ-Ⅳ级者可确诊为强直性脊柱炎。在诊断过程中要充分考虑患者的年龄、性别、生活方式等因素对临床表现和检查结果的影响，综合多方面信息进行准确诊断。
