弓形虫病原学检查包括直接镜检阳性率低、动物接种耗时繁琐;血清学检查有染色试验为金标准之一特异性高、间接血凝试验可筛查及调查但有假阳性假阴性、ELISA检测抗体常用且IgM提示近期感染IgG需结合滴度;分子生物学检查PCR灵敏度特异性高适用于早期及免疫低下者;孕妇需常规血清学检查防胎儿问题,免疫低下者需结合病原学检查综合判断。
一、病原学检查
1.直接镜检:取患者的体液(如脑脊液、羊水、胸水等)、组织活检标本等制作涂片,经吉姆萨染色或瑞氏染色后镜检,查找弓形虫滋养体,但该方法阳性率较低,因弓形虫在人体组织内多以包囊形式存在,滋养体较少见。
2.动物接种:将可疑样本接种于敏感动物(如小鼠)腹腔,观察动物是否出现发病症状,若发病则解剖取腹腔液等镜检找弓形虫,但此方法耗时较长,且操作相对繁琐。
二、血清学检查
1.染色试验(DT):是诊断弓形虫病的金标准之一,特异性高。其原理是弓形虫滋养体与患者血清中的特异性抗体结合后,在补体存在时可被染色,通过观察滋养体是否被染色来判断是否感染弓形虫,对现症感染和既往感染有较好的鉴别意义。
2.间接血凝试验(IHA):检测弓形虫特异性抗体,灵敏度较高,可用于弓形虫感染的筛查及流行病学调查,但存在一定的假阳性和假阴性可能,需结合临床综合判断。
3.酶联免疫吸附试验(ELISA):检测特异性抗体,操作相对简便,能检测IgM、IgG等抗体。其中IgM抗体阳性提示近期感染,IgG抗体阳性提示既往感染或现症感染(需结合滴度变化),是临床上常用的弓形虫感染筛查及诊断方法。
三、分子生物学检查
1.聚合酶链反应(PCR):通过扩增弓形虫特定的DNA序列来检测样本中是否存在弓形虫核酸,灵敏度和特异性较高,尤其适用于早期诊断及免疫功能低下患者(如艾滋病患者)的检测,因为这类患者的血清学检查可能出现假阴性,而PCR可直接检测病原体核酸。
特殊人群注意事项
孕妇:孕期需常规进行血清学检查,尤其是早期筛查,以便及时发现弓形虫感染并采取相应措施,因为弓形虫可通过胎盘传播给胎儿,导致胎儿畸形、流产等严重后果。
免疫功能低下者:如艾滋病患者、接受免疫抑制剂治疗的患者等,由于其免疫功能受损,血清学检查可能出现不典型表现,需结合病原学检查(如PCR)等综合判断,且这类人群感染弓形虫后病情可能更严重,需密切监测。