弓形虫感染的检查包括病原学、血清学、分子生物学检查。病原学涂片染色检查取体液镜检,阳性率低,动物接种实验特异性高但耗时;血清学抗体检测中IgM是急性感染标志,IgG示曾感染且滴度4倍以上升高提示近期感染,抗原检测是活动性感染可靠指标;分子生物学PCR可扩增特异性DNA片段检测,具高敏高特,可检多种标本,儿童检测有优势但需严操防假阳。
一、病原学检查
1.涂片染色检查:
取患者的体液(如脑脊液、羊水、血液等)涂片,经吉姆萨染色或瑞氏染色后镜检,可发现弓形虫滋养体。但这种方法的阳性率相对较低,因为弓形虫在人体内的寄生数量可能较少。对于免疫功能正常的个体,血液中弓形虫滋养体通常较少,所以血液涂片阳性率不高;而对于免疫功能低下的人群,如艾滋病患者,可能在血液中检测到更多的弓形虫滋养体,阳性率相对会有所提高。在女性孕期进行羊水涂片检查时,如果胎儿感染弓形虫,可能在羊水中检测到弓形虫滋养体,有助于早期诊断胎儿是否感染。
2.动物接种实验:
将患者的体液接种于小鼠腹腔等部位,观察小鼠是否出现弓形虫感染的症状,如出现运动失调、死亡等情况,然后再对小鼠的组织进行检查以发现弓形虫。这种方法特异性较高,但耗时较长,一般需要数天至数周才能得出结果。对于一些疑难的弓形虫感染病例,动物接种实验可以作为一种补充的检测手段。不过,由于动物实验存在一定的伦理问题和操作复杂性,现在应用相对较少。
二、血清学检查
1.抗体检测
IgM抗体检测:
IgM抗体是弓形虫急性感染的重要标志。一般采用酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法检测。感染弓形虫后,IgM抗体通常在感染后1-2周出现,3-4周达高峰,持续约3-6个月。如果检测到IgM抗体阳性,提示近期有弓形虫感染的可能。但需要注意的是,某些自身免疫性疾病等可能会出现假阳性结果。对于孕妇来说,如果检测到IgM抗体阳性,需要进一步结合其他检查来判断胎儿是否感染弓形虫。在儿童中,由于儿童免疫系统尚未完全成熟,也可能会出现一些与成人不同的血清学反应情况,需要综合分析。
IgG抗体检测:
IgG抗体出现较晚,但可长期存在甚至终身存在。IgG抗体阳性表示曾经感染过弓形虫。如果是IgG抗体由阴性转为阳性,或者滴度呈4倍以上升高,提示近期有弓形虫感染。对于不同年龄的人群,IgG抗体的检测意义有所不同。在成年人中,主要用于回顾性诊断和流行病学调查等;对于儿童,如果是母亲孕期感染弓形虫,可能会通过胎盘传给胎儿,出生后儿童的IgG抗体情况也需要结合母亲的情况以及其他检查来判断儿童是否受到弓形虫感染。
2.抗原检测:
检测弓形虫循环抗原,是弓形虫活动性感染的可靠指标。常用的方法有免疫荧光法、ELISA等。抗原检测可以较早地反映体内弓形虫的存在情况,对于早期诊断和病情监测有重要意义。例如,在艾滋病患者等免疫功能低下的人群中,由于机体免疫清除能力较弱,抗原检测可能更有助于及时发现弓形虫的感染情况。在儿童中,如果怀疑有弓形虫感染,抗原检测也可以作为一种早期诊断的手段,但需要注意不同年龄段儿童的生理差异可能对检测结果产生的影响。
三、分子生物学检查
1.聚合酶链反应(PCR):
通过扩增弓形虫的特异性DNA片段来检测弓形虫。PCR技术具有高度的敏感性和特异性。可以检测血液、脑脊液、羊水等多种标本中的弓形虫DNA。例如,在孕期通过检测孕妇血液中的弓形虫DNA,可以早期判断胎儿是否感染弓形虫。对于免疫功能低下的患者,如器官移植术后患者,PCR检测血液中的弓形虫DNA有助于早期发现隐性感染或病情复发。在儿童中,由于血液采集相对成人可能有一定难度,但PCR技术对于微量标本的检测优势明显,能够在儿童较少的血液标本中检测出弓形虫DNA,为儿童弓形虫感染的诊断提供重要依据。不过,PCR检测需要严格的实验室操作,以避免出现假阳性结果。