真菌检测有直接镜检法取脚气患处样本加10%氢氧化钾后镜检菌丝孢子判定感染，儿童需家长配合固定、老年人皮肤问题要小心、糖尿病患者采样后消毒且采样前不自行用抗真菌药；真菌培养法将样本接种特定培养基在适宜温湿度培养观察菌落形态颜色确定种类，不同人群培养有相应注意事项；分子生物学检测法用PCR等技术检测真菌DNA，儿童采样规范、老年人有基因疾病提前告知、过敏史患者谨慎选择且采样前避免影响DNA的情况。
一、直接镜检法
1.操作方式：取脚气患处的皮屑、水疱液等样本，置于载玻片上，滴加10%氢氧化钾溶液后盖上盖玻片，通过光学显微镜观察。若样本中存在真菌菌丝或孢子，即可初步判定为真菌感染。其依据是真菌在显微镜下呈现特定的形态结构，如菌丝为丝状、孢子有不同的形态特征等。
2.适用人群及注意事项：儿童进行该检测时需由家长配合固定样本部位，轻柔操作避免损伤皮肤；老年人若皮肤干燥或有破损，采样时要格外小心，防止加重皮肤损伤；有糖尿病等基础病史的患者，因皮肤易感染且愈合能力差，采样后要注意局部消毒，防止继发感染。采样前应避免自行使用抗真菌药物，否则可能影响镜检结果的准确性。
二、真菌培养法
1.操作方式：将采集的样本接种至沙保弱培养基等特定真菌培养基中，置于适宜温度（一般25-28℃）和湿度环境下培养。通过观察培养基上真菌菌落的形态、颜色等特征来确定是否为致病真菌及具体种类。培养法能明确真菌的种类，但通常需要3-7天甚至更长时间才能得出结果。
2.适用人群及注意事项：不同年龄、性别人群在培养过程中无特殊差异，但儿童培养时要确保培养基环境适宜且样本保存得当；老年人若身体状况较差，需关注培养过程中可能出现的其他并发症风险；有免疫缺陷等病史的患者，由于自身抵抗力低，培养环境要严格无菌操作，防止其他杂菌污染干扰检测结果。
三、分子生物学检测法
1.操作方式：利用聚合酶链式反应（PCR）等分子生物学技术，对样本中的真菌DNA进行检测。通过扩增特定的真菌基因片段，能快速、灵敏且特异的检测出样本中是否存在真菌及其种类。例如针对常见脚气致病真菌的特定基因序列进行扩增检测。
2.适用人群及注意事项：儿童进行分子生物学检测时，样本采集要规范以保证检测准确性，其在检测过程中无特殊年龄禁忌但需遵循儿科采样的轻柔原则；老年人若有基因检测相关的基础疾病需提前告知医生；有过敏史尤其是对PCR相关试剂过敏的患者要谨慎选择该检测方法，采样后关注局部是否有异常反应。采样前同样需避免使用影响DNA检测的药物或处理，保证样本中真菌DNA的完整性。
