视网膜母细胞瘤病因主要为遗传因素和基因突变，约40%由遗传导致（亲代携带RB1基因突变致子代发病早），体细胞突变也可引发，生活方式与体细胞突变关联证据有限，有家族史后代需密切查眼，体细胞突变患儿治疗要遵儿科安全护理原则兼顾生长发育。
遗传因素：约40%的视网膜母细胞瘤患者是由于遗传因素导致的。这种遗传可以是显性遗传，即患儿的父母中至少有一方携带相关的突变基因，该基因会传递给子代，使子代有较高的发病风险。例如，视网膜母细胞瘤基因（RB1基因）的突变是导致遗传易感性的重要原因，若亲代携带RB1基因突变，子代遗传该突变基因后，发生视网膜母细胞瘤的概率会显著增加。从年龄角度看，遗传型的视网膜母细胞瘤发病年龄通常较早，多在婴幼儿时期就表现出症状。
基因突变：体细胞突变也是引发视网膜母细胞瘤的重要原因。在胚胎发育过程中，视网膜细胞的RB1基因等发生了体细胞突变，导致细胞的生长调控出现异常，进而引发视网膜母细胞瘤。这种情况多发生在个体发育的早期阶段，与个体自身的基因在细胞分裂、分化过程中受到环境等因素影响而发生突变有关。从生活方式角度，目前尚未发现特定的生活方式因素直接导致体细胞的RB1基因等突变，但长期暴露于某些可能具有基因毒性的环境因素（如辐射等）可能会增加体细胞突变的风险，不过这种关联的证据相对有限。对于有家族遗传病史的特殊人群，如家族中有视网膜母细胞瘤患者的家庭，其后代需要更加密切地进行眼部检查，以便早期发现可能出现的视网膜母细胞瘤病变；对于因体细胞突变患病的患儿，在治疗过程中需要遵循儿科安全护理原则，密切关注患儿的身体状况和治疗反应，由于儿童身体处于发育阶段，在选择治疗方案时要充分考虑对儿童生长发育的影响。
