肛周湿疹的诊断包括病史采集（了解一般情况、肛周症状）、体格检查（局部皮肤检查、肛周周围器官检查）、实验室检查（过敏原检测、微生物检查）及鉴别诊断（与肛周银屑病、肛周扁平苔藓、肛周神经性皮炎等鉴别）。
肛周症状：详细询问肛周不适的症状表现，包括瘙痒的程度、发作时间、加重或缓解因素。例如，有的患者夜间瘙痒加剧，影响睡眠；有的患者在进食辛辣刺激性食物、饮酒后瘙痒加重。还需了解是否有皮疹出现，皮疹的形态、分布情况，如是否有红斑、丘疹、水疱、渗出、结痂、肥厚、皲裂等表现，以及这些症状持续的时间等。
体格检查
局部皮肤检查：观察肛周皮肤的外观，查看皮肤颜色是否有改变，如红斑；是否有皮疹，注意皮疹的大小、形态、数量和分布范围。检查皮肤的质地，是否有增厚、粗糙、皲裂等情况。例如，急性期肛周湿疹可能表现为密集的小丘疹、水疱，搔抓后可出现渗出、糜烂；慢性期则表现为皮肤肥厚、苔藓样变。
肛周周围器官检查：对于女性患者，要检查阴道分泌物情况，因为阴道炎症分泌物刺激可能导致肛周湿疹；对于男性患者，要检查是否有肛瘘、痔等肛周疾病，这些疾病可能引起局部潮湿、分泌物增多，进而诱发肛周湿疹。
实验室检查
过敏原检测：如果怀疑是过敏性因素引起的肛周湿疹，可以进行过敏原检测。检测方法包括斑贴试验、血清特异性IgE检测等。斑贴试验可以检测接触性过敏原，将可疑的过敏原贴敷于患者皮肤表面，观察局部皮肤反应来判断是否对该过敏原过敏；血清特异性IgE检测则可以检测患者体内针对某种过敏原的特异性免疫球蛋白E水平，帮助明确是否存在过敏性体质及可能的过敏原。例如，若患者对某些食物（如鱼虾、牛奶等）、吸入物（如花粉、尘螨等）过敏，可能与肛周湿疹的发生相关。
微生物检查：如果肛周有渗出、糜烂等情况，需要进行微生物检查，如真菌镜检和培养。因为肛周潮湿环境容易滋生真菌，如白色念珠菌等，真菌感染可能导致肛周湿疹样改变。通过真菌镜检可以直接观察是否有真菌菌丝或孢子，真菌培养可以明确具体的真菌种类，以便针对性治疗。
鉴别诊断
肛周银屑病：肛周银屑病表现为边界清楚的红斑，上覆银白色鳞屑，刮除鳞屑后可见点状出血，皮疹形态与肛周湿疹不同，通过皮肤活检等可以鉴别。
肛周扁平苔藓：肛周扁平苔藓多表现为多角形扁平丘疹，呈紫红色，瘙痒明显，皮疹形态及组织病理表现与肛周湿疹有差异，可通过组织病理检查进行鉴别。
肛周神经性皮炎：肛周神经性皮炎与精神因素关系密切，皮肤损害多为苔藓样变，瘙痒剧烈，病程慢性，与肛周湿疹的急性期和慢性期表现有不同之处，可通过病史、皮疹特点等进行鉴别。
