子宫性闭经的诊断需从病史采集、体格检查、实验室检查、影像学检查、宫腔镜检查及子宫内膜活检等多方面进行。病史采集要关注年龄、月经史、既往史；体格检查包括第二性征及妇科检查；实验室检查有激素水平和甲状腺功能测定；影像学检查有B超和子宫输卵管造影；宫腔镜可直接观察宫腔内情况；子宫内膜活检了解内膜对卵巢激素反应性，特殊人群需针对性关注。
既往史：询问患者既往有无子宫手术史，如刮宫术、子宫肌瘤剔除术等，子宫手术可能损伤子宫内膜或肌层导致闭经。有无内分泌疾病史，如甲状腺功能异常等，甲状腺功能异常可通过影响下丘脑-垂体-卵巢轴进而影响子宫功能导致闭经。有无放疗史，盆腔放疗可能破坏子宫内膜。
体格检查
第二性征检查：观察患者的乳房发育情况，乳房发育不良可能提示性腺发育不全等问题。检查阴毛、腋毛分布，阴毛、腋毛稀少或缺失可能与性腺发育异常相关。
妇科检查：检查外阴发育情况，有无畸形；阴道是否通畅，有无闭锁等异常；子宫大小、形态，通过B超等辅助检查了解子宫体积，若子宫过小可能提示子宫发育不良；双侧附件有无异常。
实验室检查
激素水平测定：测定性激素六项，包括雌二醇、孕酮、睾酮、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、泌乳素（PRL）。若FSH、LH水平正常或偏低，雌二醇水平低，提示子宫性闭经可能；若FSH显著升高，提示卵巢功能衰竭，但需结合临床排除子宫因素。PRL升高时需排除垂体病变，但也要考虑是否因子宫病变导致的反馈异常。
甲状腺功能检查：甲状腺素（T4）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、促甲状腺激素（TSH）等指标异常可影响下丘脑-垂体-卵巢轴，导致闭经，所以甲状腺功能检查有助于排查相关病因。
影像学检查
B超检查：经阴道B超可清晰观察子宫形态、内膜厚度等。正常子宫内膜厚度在月经周期不同时期有变化，若子宫内膜薄且无周期性变化，提示可能存在子宫性闭经。还可观察卵巢形态、大小及卵泡情况。
子宫输卵管造影：了解子宫腔形态，有无宫腔粘连、畸形等。若发现宫腔粘连，可明确闭经与宫腔粘连相关。
宫腔镜检查
可直接观察宫腔内情况，明确有无宫腔粘连、子宫内膜炎、子宫内膜息肉等病变。通过宫腔镜能直观看到宫腔内膜的状态，是诊断子宫性闭经的重要手段之一，尤其对怀疑宫腔粘连的患者，宫腔镜检查可明确诊断并同时进行初步处理。
子宫内膜活检
取子宫内膜组织进行病理检查，了解子宫内膜对卵巢激素的反应性。若子宫内膜有分泌期变化，提示卵巢有排卵，闭经原因在子宫；若子宫内膜无分泌期变化，可能为卵巢功能异常等，但也需结合其他检查排除子宫因素。例如，若子宫内膜活检显示为增殖期子宫内膜，结合激素水平等检查，可进一步分析是否为子宫性闭经。
特殊人群方面，对于青春期女性出现子宫性闭经，要特别关注其生长发育情况，因为生殖道发育异常可能同时伴有其他系统的发育问题；对于有子宫手术史的生育期女性，要详细询问手术细节，评估手术对子宫的损伤程度；对于合并内分泌疾病的患者，在诊断子宫性闭经时要综合考虑内分泌疾病与子宫闭经的相互影响，制定全面的诊断和治疗方案。
