单纯疱疹病毒性角膜炎的诊断包括病史采集，询问发病时间、症状发展、诱因、既往单纯疱疹病史及近期免疫力情况；眼部检查，通过裂隙灯观察角膜病变和前房反应，用角膜知觉计检查角膜知觉；实验室检查，病毒学检查有病毒分离培养、抗原检测、核酸检测，血清学检查检测血清中抗体；病情复杂者可能行共聚焦显微镜检查。
一、病史采集
详细询问患者的病史，包括发病的时间、症状的发展过程，是否有发热、感冒等诱发因素，既往是否有单纯疱疹病史，近期是否有身体免疫力低下的情况，如劳累、压力大、患有其他慢性疾病等，这些因素对于判断单纯疱疹病毒性角膜炎的病因和病情严重程度有重要意义。例如，长期患有糖尿病的患者，由于血糖控制不佳，机体免疫力下降，更容易发生单纯疱疹病毒性角膜炎，且病情可能相对较重，恢复较慢。
二、眼部检查
1.裂隙灯检查
角膜病变观察：通过裂隙灯可以清晰地观察到角膜的病变情况，如是否有树枝状、地图状的角膜浸润病灶。树枝状角膜炎表现为角膜上皮出现树枝状的荧光素染色阳性区域，边缘不整齐；地图状角膜炎则是在树枝状病变的基础上，病变进一步扩大融合，形成不规则的地图状形态。不同形态的病变有助于判断病情的阶段和严重程度。
前房反应检查：观察前房是否有炎症反应，如房水闪辉、细胞等。房水闪辉提示前房内有蛋白质等渗出物，细胞阳性表示有炎症细胞存在，这些反应可以反映角膜炎症的严重程度以及是否累及前房组织。
2.角膜知觉检查：单纯疱疹病毒性角膜炎患者的角膜知觉通常会减退，这是因为病毒侵犯角膜感觉神经纤维导致的。通过角膜知觉计可以定量检测角膜知觉，了解神经受损的情况。对于儿童患者，由于其表述能力有限，角膜知觉检查可以帮助医生间接判断角膜的病变情况，但需要注意检查时的操作轻柔，避免引起患儿的不适。
三、实验室检查
1.病毒学检查
病毒分离培养：从患者的角膜病变部位取材，进行单纯疱疹病毒的分离培养。这是诊断单纯疱疹病毒性角膜炎的金标准，但操作相对复杂，需要一定的时间和技术条件。通过培养可以明确是否有单纯疱疹病毒感染，并进一步进行病毒的鉴定和分型。
抗原检测：采用免疫荧光法或酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法检测角膜病变组织或眼部分泌物中的单纯疱疹病毒抗原。这种方法相对快速，能够在较短时间内得出结果，有助于早期诊断。例如，免疫荧光法可以直接在荧光显微镜下观察到被荧光标记的病毒抗原，从而确定病毒感染。
核酸检测：利用聚合酶链反应（PCR）技术检测单纯疱疹病毒的核酸。PCR技术具有很高的敏感性和特异性，可以检测到极少量的病毒核酸，对于早期、轻症或不典型的病例诊断有重要价值。例如，实时荧光定量PCR技术不仅能检测病毒核酸的存在，还能定量分析病毒的载量，对于病情的监测和治疗效果的评估有一定帮助。
2.血清学检查：检测患者血清中的单纯疱疹病毒抗体，如IgG、IgM抗体。IgM抗体阳性提示近期有单纯疱疹病毒感染，IgG抗体阳性表示既往感染过单纯疱疹病毒。通过血清学检查可以辅助诊断，了解患者的感染状态，但单独的血清学检查不能确诊当前的角膜病变就是由单纯疱疹病毒引起，需要结合眼部的临床表现等综合判断。例如，在急性感染期，患者血清中的IgM抗体水平会升高，随着病情的恢复，IgG抗体水平会逐渐升高。
四、其他检查
对于病情较为复杂或需要进一步评估的患者，可能还会进行共聚焦显微镜检查等。共聚焦显微镜可以在活体状态下观察角膜组织的细胞结构，有助于发现角膜内的病毒感染相关细胞改变，如上皮细胞内的病毒包涵体等，对于早期诊断和病情监测有一定的帮助，但该检查费用相对较高，且对操作人员的技术要求较高。
