十二指肠溃疡有疼痛节律性（空腹痛、进食缓解、周期性发作）、其他症状（反酸、嗳气等）及体征表现，辅助检查有胃镜、幽门螺杆菌检测、X线钡餐检查，需与胃溃疡、胃癌、卓-艾综合征鉴别，特殊人群如老年人、儿童、女性有不同特点。
节律性：十二指肠溃疡的疼痛具有明显的节律性，多为空腹痛，常在空腹时（如饥饿时、夜间）发作，疼痛性质可为钝痛、胀痛、灼痛或剧痛等，进食后可缓解。一般来说，疼痛在进食后0.5-3小时开始出现，如不进食则持续至下次进餐，这是因为空腹时胃酸直接进入十二指肠，刺激溃疡面引起疼痛，进食后胃酸被食物中和，疼痛得以缓解。例如，有研究发现约60%的十二指肠溃疡患者具有这种空腹痛、进食缓解的节律性疼痛特点。
周期性：病情容易反复发作，呈现周期性发作的特点。发作期可为数周甚至数月，缓解期长短不一。季节变化常是诱发因素，秋冬和冬春之交是该病的高发季节，这可能与气温变化影响胃肠道功能以及胃酸分泌调节有关。
其他症状
可能伴有反酸、嗳气、恶心、呕吐等症状。反酸是由于胃酸分泌过多，反流至食管引起；嗳气是胃内气体增多，经食管排出的现象；恶心、呕吐多在溃疡活动期出现，当溃疡导致幽门痉挛时，呕吐症状可能较为明显，呕吐物多为宿食。
体征表现
在缓解期通常无明显体征，当溃疡活动期并发穿孔等并发症时，可能出现腹膜刺激征，如腹部压痛、反跳痛、腹肌紧张等。若发生大量出血，可能出现贫血貌，如面色苍白、口唇甲床苍白等，还可能有脉搏细速等表现。
辅助检查
胃镜检查
是诊断十二指肠溃疡最准确的方法。可以直接观察十二指肠黏膜的病变情况，能发现溃疡的部位、大小、形态等。内镜下十二指肠溃疡多呈圆形或椭圆形，边缘整齐，底部覆有灰白色或黄白色苔膜，周围黏膜充血、水肿。通过胃镜检查还可以同时取病变组织进行病理活检，以排除恶性病变。例如，胃镜检查对于十二指肠溃疡的诊断阳性率可达95%以上。
幽门螺杆菌检测
尿素呼气试验：包括碳-13和碳-14尿素呼气试验，是一种非侵入性的检测方法。原理是幽门螺杆菌能产生尿素酶，可分解尿素，通过检测呼出气体中尿素的分解产物来判断是否感染幽门螺杆菌。该方法操作简便，患者依从性好，是临床上常用的检测方法之一。
胃镜下快速尿素酶试验：在胃镜检查时取胃黏膜组织进行快速尿素酶试验，阳性结果提示幽门螺杆菌感染。这种方法可以在诊断溃疡的同时明确是否存在幽门螺杆菌感染，有助于制定治疗方案。
X线钡餐检查
适用于对胃镜检查有禁忌或不愿接受胃镜检查的患者。溃疡的X线直接征象是龛影，对诊断十二指肠溃疡有重要价值；间接征象有局部压痛、十二指肠球部激惹、球部畸形等，但间接征象不如胃镜检查直接准确。例如，当十二指肠球部出现畸形时，高度提示十二指肠溃疡的可能，但需要结合临床其他表现综合判断。
与其他疾病的鉴别
胃溃疡
胃溃疡的疼痛节律与十二指肠溃疡不同，多为进食后疼痛，疼痛在进食后0.5-1小时出现，1-2小时后逐渐缓解，具有进食-疼痛-缓解的规律。而十二指肠溃疡是空腹疼痛、进食缓解。此外，通过胃镜检查可以直观区分两者，胃溃疡的溃疡多位于胃角、胃窦等部位，形态、大小等与十二指肠溃疡也有一定差异。
胃癌
胃癌也可出现类似十二指肠溃疡的疼痛症状，但胃癌的疼痛无明显节律性，病情进展较快，患者常伴有消瘦、乏力、贫血等全身症状。胃镜及病理活检是鉴别胃癌与十二指肠溃疡的关键手段，胃癌在胃镜下可见溃疡形态不规则，边缘不整齐，底部凹凸不平，周围黏膜皱襞中断等，病理活检可明确病变性质。
卓-艾综合征
又称胃泌素瘤，是胰腺非β细胞瘤分泌大量胃泌素所致。患者胃酸分泌极度增多，导致多发性、难治性十二指肠溃疡，溃疡可发生在不典型部位（如球后、空肠上段等）。除了有十二指肠溃疡的一般表现外，还常伴有腹泻等症状。通过测定血清胃泌素水平、做促胰液素刺激试验等可帮助鉴别，血清胃泌素明显升高是重要的诊断依据。
特殊人群方面，老年人患十二指肠溃疡时，疼痛节律可能不典型，容易被忽视，且并发症发生率较高，如出血、穿孔等风险相对增加，应更加重视胃镜等检查的应用。儿童患十二指肠溃疡相对较少，但也可出现腹痛等症状，需要与肠系膜淋巴结炎等疾病鉴别，诊断时要考虑儿童的生理特点，选择合适的检查方法，尽量减少创伤性检查的不适。女性在不同生理时期，如经期、孕期等，激素水平变化可能影响胃肠道功能，在鉴别诊断时需考虑这些因素对症状的影响。
