溶血性贫血的诊断需从病史采集、体格检查、实验室检查和影像学检查等方面进行。病史采集要关注现病史中不同年龄表现、生活方式相关情况及既往史中贫血、黄疸等病史；体格检查观察一般情况和专科检查肝脾大小；实验室检查包括血常规、溶血相关及病因学检查；影像学检查有超声和CT等，用于辅助诊断及评估病情。
一、病史采集
1.现病史
对于不同年龄人群，表现有所差异。儿童溶血性贫血可能出现面色苍白、黄疸、尿色改变等情况，新生儿溶血性贫血需询问是否有早产、母亲血型等情况；成人则需询问有无发热、寒战、腰痛、酱油色尿等急性溶血表现，以及有无乏力、头晕等慢性溶血表现。要了解症状出现的时间、发展过程、加重或缓解因素等。
生活方式方面，有无近期接触特殊药物（如磺胺类、解热镇痛药等）、毒物（如苯、砷等）、食用特殊食物（如蚕豆等）史，蚕豆病患者食用蚕豆后可诱发溶血。
2.既往史
询问既往有无贫血病史、黄疸病史，有无自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮等）、感染性疾病（如疟疾等）病史，这些疾病可能与溶血性贫血的发生相关。对于女性患者，需询问有无妊娠期溶血性贫血病史。
二、体格检查
1.一般情况
观察患者面色、皮肤色泽，有无苍白、黄疸等表现。新生儿溶血性贫血时，需重点观察皮肤黄染程度及进展情况。
测量生命体征，急性溶血患者可能出现心率加快、血压下降等休克表现；慢性溶血患者可能有低热等情况。
2.专科检查
检查肝脾大小，溶血性贫血患者多有肝脾肿大，新生儿溶血性贫血时肝脾肿大较为常见，不同年龄人群肝脾肿大的程度可能不同，儿童肝脾肿大可能提示骨髓外造血活跃。
三、实验室检查
1.血常规
红细胞计数及血红蛋白测定：呈不同程度的贫血，急性溶血时血红蛋白可迅速下降。不同年龄正常血红蛋白值不同，新生儿出生后逐渐降低，儿童及成人有相应的正常范围，血红蛋白低于正常范围提示贫血。
网织红细胞计数：网织红细胞增多提示骨髓红系代偿性增生，常见于溶血性贫血。不同年龄网织红细胞正常范围有差异，溶血性贫血时网织红细胞计数可明显升高，如蚕豆病患者网织红细胞可显著增多。
外周血涂片：可见红细胞形态改变，如球形红细胞增多常见于遗传性球形红细胞增多症；靶形红细胞增多常见于珠蛋白生成障碍性贫血等；可见红细胞碎片，提示微血管病性溶血性贫血等。
2.溶血相关的实验室检查
血清胆红素测定：血清总胆红素升高，以间接胆红素升高为主，常见于溶血性贫血。不同年龄血清胆红素正常范围不同，新生儿生理性黄疸有其特定范围，溶血性贫血时胆红素升高超过正常范围且以间接胆红素升高明显。
尿胆红素及尿胆原测定：尿胆红素阴性，尿胆原增加，这是因为溶血导致胆红素生成增多，超过肝细胞摄取、结合和排泄能力，未结合胆红素增加，经代谢后尿胆原排出增多。
血清结合珠蛋白测定：血清结合珠蛋白降低，因为血红蛋白与结合珠蛋白结合后被单核-巨噬细胞系统清除，溶血性贫血时血红蛋白释放增多，与结合珠蛋白结合增加，导致血清结合珠蛋白降低。
高铁血红蛋白还原试验：用于筛查葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺乏症，G-6-PD缺乏症患者高铁血红蛋白还原率降低。
抗人球蛋白试验（Coombs试验）：分为直接Coombs试验和间接Coombs试验，直接Coombs试验用于检测红细胞表面的不完全抗体，间接Coombs试验用于检测血清中的不完全抗体，自身免疫性溶血性贫血患者直接Coombs试验阳性。
3.病因学检查
遗传性溶血性贫血相关检查：对于怀疑遗传性溶血性贫血的患者，可进行红细胞渗透脆性试验，遗传性球形红细胞增多症患者红细胞渗透脆性增高；进行血红蛋白电泳，珠蛋白生成障碍性贫血患者可出现异常血红蛋白带等。
获得性溶血性贫血相关检查：如怀疑阵发性睡眠性血红蛋白尿症，可进行酸溶血试验（Ham试验）、蔗糖溶血试验等，这些检查有助于明确是否存在补体介导的溶血。
四、影像学检查
1.超声检查
对于肝脾肿大的溶血性贫血患者，超声检查可更清晰地观察肝脾的大小、形态、内部结构等，了解有无脾梗死等并发症。对于新生儿溶血性贫血，超声可监测肝脏、脾脏及胆道系统情况，评估病情严重程度。
2.CT检查
在某些复杂病例中，如怀疑有骨髓增生异常等情况导致的溶血性贫血，CT检查可辅助观察骨髓情况，但一般不作为首选，除非有特殊的临床指征。
