免疫组化检查是应用抗原与抗体特异性结合原理,经标本制备、抗原修复、加一抗、加二抗、显色观察等步骤,用于定位、定性及定量研究组织细胞内抗原,在肿瘤诊断与鉴别诊断、病理研究、指导临床治疗等领域应用,特殊人群如儿童、孕妇、老年人进行该检查有相应注意事项。

一、免疫组化检查的定义
免疫组化检查是应用免疫学抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
二、免疫组化检查的原理
利用抗原与抗体特异性结合的特性,将已知抗体标记上显色剂,然后与组织或细胞中的抗原反应,抗原抗体结合后,通过显色剂的显色来确定抗原的存在部位、含量等。例如,在肿瘤诊断中,可通过免疫组化来鉴别肿瘤的来源、判断肿瘤的恶性程度等。
三、免疫组化检查的步骤
1.标本制备:通常是将手术切除的组织、穿刺获取的组织等制成组织切片或细胞涂片等标本。
2.抗原修复:如果标本中的抗原在固定等过程中发生了隐蔽,需要进行抗原修复,常用的方法有热修复、酶修复等,以暴露抗原表位,便于抗体结合。
3.加一抗:将特异性的一抗与标本孵育,一抗与标本中的抗原特异性结合。
4.加二抗:再加入与一抗特异性结合的二抗,二抗上通常标记有显色剂。
5.显色观察:通过显色剂的显色反应,在显微镜下观察抗原存在的部位和显色强度等情况。
四、免疫组化检查的应用领域
1.肿瘤诊断与鉴别诊断
肿瘤分类:不同类型的肿瘤具有特定的抗原表达谱,通过免疫组化可以准确对肿瘤进行分类,例如,在乳腺癌的诊断中,通过检测ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)、HER-2等抗原的表达情况来指导治疗和判断预后。
肿瘤来源判断:对于一些转移性肿瘤,难以确定其原发部位时,免疫组化可以发挥作用,比如通过检测甲状腺球蛋白等指标来判断甲状腺来源的肿瘤转移灶等。
2.病理研究:在基础病理研究中,用于探究疾病发生发展过程中的蛋白表达变化等机制性问题。
3.指导临床治疗:如前面提到的乳腺癌中根据ER、PR、HER-2的表达情况来选择内分泌治疗、靶向治疗等方案;在淋巴瘤的诊断和治疗中,也可通过免疫组化来选择合适的治疗方案。
五、特殊人群注意事项
1.儿童:儿童进行免疫组化检查时,需要特别注意标本的获取方式,如穿刺等操作要严格遵循儿科安全护理原则,尽量减少对儿童身体的创伤和不良影响。由于儿童的组织特点等,在抗原修复等步骤可能需要根据儿童的具体情况进行适当调整,但都要以保障儿童安全和检查准确性为前提。
2.孕妇:如果孕妇需要进行免疫组化检查,要考虑到检查过程中使用的试剂等对胎儿是否有潜在影响,一般会谨慎评估检查的必要性,只有在病情需要且利大于弊时才会进行,并且在检查过程中要采取必要的防护措施来保护胎儿。
3.老年人:老年人进行免疫组化检查时,要考虑到老年人可能存在的基础疾病等情况,在标本获取过程中要注意操作轻柔,避免因操作不当引起老年人身体不适。同时,在检查后要密切观察老年人的反应,因为老年人的身体恢复等能力相对较弱。