诊断再生障碍性贫血的最重要依据是骨髓造血功能衰竭的客观证据，结合骨髓穿刺涂片及骨髓活检的典型表现，同时排除其他类似疾病。
2.骨髓穿刺涂片：骨髓有核细胞增生重度减低，造血细胞（粒系、红系、巨核系）显著减少，非造血细胞（淋巴细胞、浆细胞、网状细胞等）比例增高，脂肪滴明显增多。
3.骨髓活检：造血组织面积显著减少，脂肪组织增生，造血细胞分布稀疏且形态异常，巨核细胞数量极度减少或缺乏，骨髓基质水肿或纤维化（重型病例常见）。
4.血常规检查：全血细胞减少（红细胞、白细胞、血小板均降低），网织红细胞绝对值降低，白细胞分类中淋巴细胞比例相对增高，血小板形态偏小且数量减少。
5.排除性检查：需通过血常规、肝肾功能、凝血功能、病毒标志物（如EB病毒、巨细胞病毒）、自身抗体谱等检查排除其他引起全血细胞减少的疾病，如阵发性睡眠性血红蛋白尿、骨髓增生异常综合征、急性白血病等。
6.特殊人群提示：儿童患者需注意与先天性再生障碍性贫血（如范可尼贫血）鉴别，女性患者应关注是否存在自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮）相关影，老年患者需警惕慢性疾病（如慢性肾病、肝病）或药物毒性导致的骨髓抑制。
