自闭症的诊断涉及临床观察与病史采集、量表评估、实验室检查和影像学检查。临床观察包括行为表现及不同年龄特点，病史采集涵盖孕期、分娩及家族史；量表评估有CARS和CHAT；实验室检查含遗传学和代谢性疾病筛查；影像学检查有MRI和fMRI，用于观察结构和功能异常。
病史采集：了解孕妇在孕期的情况，如是否有感染、接触有害物质等；分娩过程是否顺利，有无早产、窒息等情况；家族中是否有类似的神经发育障碍疾病等。这些病史信息对于判断自闭症的可能诱因有重要意义。
量表评估
儿童自闭症评定量表（CARS）：这是一种常用的评估工具，从人际关系、模仿、情感反应等15个项目进行评分，根据得分判断儿童是否患有自闭症及病情的严重程度。不同年龄段的儿童在各个项目上的表现标准不同，例如对于2-3岁的儿童，人际关系方面主要看是否主动寻求与他人的接触等。
婴幼儿孤独症筛查量表（CHAT）：适用于18-24个月的婴幼儿，通过询问家长一些关于儿童社交行为、语言发展等方面的问题来进行初步筛查。比如是否对呼唤名字有反应、是否有模仿行为等。
实验室检查
遗传学检查：部分自闭症与遗传因素有关，会进行染色体核型分析、基因检测等。例如，脆性X综合征是导致自闭症的常见遗传原因之一，通过基因检测可以发现相关的基因突变。不同的遗传突变类型在不同年龄阶段的儿童中表现可能不同，对于有家族遗传倾向的儿童，遗传学检查尤为重要。
代谢性疾病筛查：一些代谢性疾病也可能表现出自闭症样症状，会进行血生化检查等，如苯丙酮尿症等，通过检测血液中的相关代谢产物水平来进行判断。不同代谢性疾病在不同年龄的儿童中发病机制不同，临床表现也有差异，通过实验室检查可以早期发现并进行干预。
影像学检查
脑部磁共振成像（MRI）：可以观察脑部结构是否存在异常，如大脑皮质的发育情况、脑室周围是否有异常等。不同年龄儿童的脑部结构在MRI上有正常的发育参考标准，通过对比可以发现是否存在与自闭症相关的脑部结构异常。例如，部分自闭症儿童可能存在小脑体积减小等情况。
功能性磁共振成像（fMRI）：能够检测大脑在不同功能活动时的血流变化，了解大脑的功能连接情况。对于自闭症儿童，可能会发现大脑某些区域之间的功能连接异常，不同年龄阶段的儿童大脑功能连接的正常范围不同，通过fMRI检查可以从功能层面进一步了解自闭症的神经生物学基础。
