再生障碍性贫血通过骨髓穿刺检查（骨髓涂片细胞形态学可见骨髓增生减低等，骨髓活检可见造血组织减少、脂肪组织增加）、血常规检查（全血细胞减少）来诊断，还需与阵发性睡眠性血红蛋白尿（可通过相关试验鉴别）、骨髓增生异常综合征（骨髓象有病态造血等可鉴别）鉴别，不同年龄患者在各检查及鉴别中表现有差异，儿童患者因自身特点在一些方面需特殊关注。
一、骨髓穿刺检查
1.骨髓涂片细胞形态学
再生障碍性贫血患者骨髓涂片可见骨髓增生减低或重度减低。有核细胞明显减少，粒、红系及巨核细胞系均明显减少，淋巴细胞、浆细胞、肥大细胞等非造血细胞比例增高。例如，多项临床研究显示，再生障碍性贫血患者骨髓象中造血细胞显著减少，非造血细胞比例可高达50%以上。对于不同年龄的患者，骨髓增生减低的表现可能在儿童和成人中都有体现，但儿童患者由于骨髓造血储备相对有限，骨髓增生减低的程度可能对其造血功能影响更为明显。
2.骨髓活检
骨髓活检可见造血组织均匀减少，脂肪组织增加。正常骨髓造血组织与脂肪组织比例约为1：1，而再生障碍性贫血患者骨髓活检中造血组织比例明显降低，可低于25%。在不同性别患者中，骨髓活检的表现并无显著性别差异，但在不同年龄阶段，儿童患者骨髓造血组织减少可能导致其生长发育相关的造血需求更难以满足，需要更密切关注骨髓造血功能情况。
二、血常规检查
1.全血细胞减少
再生障碍性贫血患者血常规表现为三系减少，即红细胞、白细胞及血小板均减少。红细胞计数下降，血红蛋白浓度降低，可出现贫血表现，如面色苍白、乏力等；白细胞总数减少，中性粒细胞明显减少，患者易发生感染；血小板计数减少，患者可出现皮肤紫癜、瘀斑、鼻出血、牙龈出血等出血倾向。在不同年龄患者中，全血细胞减少的程度可能有所不同。儿童患者由于处于生长发育阶段，全血细胞减少可能影响其正常的生长发育过程，如导致生长迟缓等；成年患者全血细胞减少则会影响其日常工作和生活，增加感染和出血的风险。
三、排除其他疾病
1.与阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）鉴别
阵发性睡眠性血红蛋白尿可通过酸溶血试验（Ham试验）、蛇毒因子溶血试验及尿含铁血黄素试验（Rous试验）等进行鉴别。再生障碍性贫血患者上述试验结果为阴性，而PNH患者可呈阳性。对于不同年龄的患者，在进行这些鉴别试验时，需要考虑到年龄对试验结果的影响因素可能不同。例如，儿童患者的标本采集和试验操作需要更加谨慎，以确保试验结果的准确性。
2.与骨髓增生异常综合征（MDS）鉴别
骨髓增生异常综合征患者骨髓象有一系或多系病态造血，如红细胞出现巨幼样变、环形铁粒幼细胞增多等，染色体检查可发现异常。而再生障碍性贫血患者骨髓象无病态造血，染色体检查一般无异常。在不同性别患者中，MDS和再生障碍性贫血的鉴别可能需要综合考虑患者的整体临床情况，但性别本身对两者的鉴别诊断影响不大。对于年龄较小的患者，MDS相对较少见，但一旦出现需要与再生障碍性贫血仔细鉴别，因为两者的治疗和预后有所不同。
