自身免疫性溶血性贫血的诊断需通过病史采集（包括年龄性别、既往病史）、临床表现观察（一般表现如贫血、黄疸，溶血相关表现如肝脾肿大）、实验室检查（血常规看红细胞、网织红细胞，外周血涂片看红细胞形态，溶血相关生化检查看胆红素、LDH，自身抗体检测如Coombs试验，病因学检查排查继发因素）及鉴别诊断（与其他溶血性贫血如遗传性球形红细胞增多症、地中海贫血等鉴别）来综合进行，以明确患者是否患病、具体类型及病因。
一、病史采集
年龄与性别：不同年龄段和性别患者可能有不同的病因倾向。例如，儿童自身免疫性溶血性贫血可能与感染等因素关系密切，某些自身免疫性疾病在女性中的发生率相对较高。
病史：详细询问患者既往病史，如是否有自身免疫性疾病史（如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等）、感染史（特别是病毒感染，如EB病毒、巨细胞病毒感染等）、输血史等。若患者有自身免疫性疾病病史，发生自身免疫性溶血性贫血的风险可能增加；有特殊感染史可能提示与感染相关的自身免疫性溶血性贫血。
二、临床表现观察
一般表现：患者可能出现贫血相关表现，如面色苍白、乏力、头晕等。不同年龄患者贫血表现可能有所差异，儿童可能因贫血出现生长发育迟缓等情况。还可能有黄疸，这是由于红细胞破坏增多，胆红素生成过多超过肝脏处理能力所致，皮肤、巩膜可出现黄染。
溶血相关表现：部分患者可能有肝脾肿大，年龄较小的儿童由于肝脏、脾脏相对较大，肝脾肿大可能更容易被发现。
三、实验室检查
血常规
红细胞计数及血红蛋白：红细胞计数降低，血红蛋白浓度下降，提示贫血。不同年龄正常血红蛋白值不同，儿童有其相应的正常范围，若低于同年龄正常范围则需考虑贫血可能。
网织红细胞计数：网织红细胞是未成熟的红细胞，自身免疫性溶血性贫血时网织红细胞计数通常升高，提示骨髓红细胞代偿性增生。
外周血涂片：可见红细胞形态改变，如球形红细胞增多等，球形红细胞增多常见于温抗体型自身免疫性溶血性贫血，通过观察红细胞形态有助于初步判断溶血情况。
溶血相关生化检查
血清胆红素：总胆红素升高，以间接胆红素升高为主，反映红细胞破坏增多，胆红素生成增加。
乳酸脱氢酶（LDH）：LDH水平升高，因为红细胞破坏释放出LDH，其水平可反映溶血的程度。
自身抗体检测
抗人球蛋白试验（Coombs试验）：是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要指标。分为直接Coombs试验和间接Coombs试验。直接Coombs试验检测红细胞表面的自身抗体，间接Coombs试验检测血清中的游离自身抗体。温抗体型自身免疫性溶血性贫血通常直接Coombs试验阳性，冷抗体型自身免疫性溶血性贫血可能直接或间接Coombs试验阳性。
病因学检查：为明确病因，可能需要进一步进行相关检查，如自身免疫性疾病相关抗体检测（如抗核抗体、抗双链DNA抗体等）以排查是否由自身免疫性疾病继发引起；病毒学检查以排除感染相关因素等。
四、鉴别诊断
需要与其他原因引起的溶血性贫血相鉴别，如遗传性球形红细胞增多症、地中海贫血等。遗传性球形红细胞增多症有其特征性的临床表现和实验室检查特点，如家族史、外周血球形红细胞增多等；地中海贫血则有特定的基因改变等表现，通过详细的病史询问、实验室检查等可以进行鉴别。
通过以上病史采集、临床表现观察、实验室检查及鉴别诊断等步骤，综合判断患者是否患有自身免疫性溶血性贫血，并明确其具体类型和病因，从而进行准确的诊断。
