发布于 2026-09-26
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免疫组化需先获取合适组织或细胞样本经固定包埋等处理，接着进行抗原修复（有酶消化法和热修复法），再选取特异性一抗与抗原结合并通过二抗标记系统标记，最后通过显微镜观察标记情况结合多方面信息辅助疾病诊断鉴别及预后判断。
一、样本处理免疫组化首先需要获取合适的组织或细胞样本，通常会对样本进行固定处理，常用甲醛固定等方法，固定的目的是保持细胞的形态结构以及抗原的稳定性，之后还会进行包埋等操作以便后续切片制备，获取薄切片用于后续免疫标记操作。二、抗原修复由于组织样本经固定等处理后，抗原表位可能被封闭或结构发生改变，所以需要进行抗原修复。常见的抗原修复方法有酶消化法，如用胰蛋白酶等消化处理；还有热修复法，通过高温高压等方式使抗原表位恢复原本的空间构象，从而能够与抗体更好地结合。三、免疫标记选取特异性的一抗与样本中的抗原进行特异性结合，一抗具有针对特定抗原的专一性。之后再通过连接合适的二抗标记系统，比如利用生物素-亲和素系统或者荧光标记的二抗等，使标记物能够与一抗-抗原复合物结合，从而实现对抗原的标记。四、结果观察与分析通过显微镜观察免疫标记后的样本，根据标记物显色或发光的情况来判断抗原的表达情况。观察阳性染色的部位（如细胞内、细胞膜等）、染色强度等，结合临床病史、组织学形态等多方面信息进行综合分析，以辅助疾病的诊断、鉴别诊断以及预后判断等。
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