真两性畸形需要综合医务人员进行查体和体格检查，以及相关实验室检查，还有影像学检查、病理学检查，综合评估之后才能够诊断。在查体时可以发现外生殖器生长特别像女性，尤其是毛发的分布，但是又存在睾丸组织，和大阴唇的外形相似。其次实验室检查，主要是针对染色体核型和生殖腺进行检查，但是最终的确诊依据还是依靠病理学检查，尤其是生殖腺的病理学检查，才能够明确诊断。影像学上的检查可以借助腹部彩超，以及盆、腹腔的CT来判断，是否同时存在卵巢和睾丸这两种生殖腺。最后就需要进行病理检查，病理检查的前提是要进行手术，选择开腹手术或者是腹腔镜手术，对生殖腺进行切除术，将切除的组织送病理学检查。如果能同时证实卵巢和睾丸存在，就可以诊断为真两性畸形。
