验孕试纸通过检测尿液中特定的人绒毛膜促性腺激素（hCG）来判断是否怀孕，其核心原理是基于免疫层析技术的抗原抗体特异性结合反应。hCG由妊娠滋养层细胞分泌，在受精卵着床后7~10天左右开始出现在尿液中，试纸通过单克隆抗体的特异性识别与显色反应实现检测。
一、检测原理：hCG是妊娠早期胎盘分泌的糖蛋白激素，在受精卵着床后即进入母体血液循环，约1~2天后可通过肾小球滤过进入尿液。试纸通过单克隆抗体的特异性结合能力，与尿液中hCG抗原形成复合物，进而通过显色反应呈现检测结果。单克隆抗体的高特异性确保仅识别hCG分子的特定抗原表位，避免与其他激素交叉反应。
二、检测机制：试纸采用三明治式免疫层析结构，包含样品垫、反应区、检测区、对照区及吸水区。当尿液样本滴入样品垫后，通过毛细作用向上移动：1.尿液中的hCG首先与包被在反应区的标记抗体（如胶体金标记抗体）结合；2.复合物随层析液继续移动至检测区，与固定在检测区的另一株单克隆抗体结合，形成“hCG-标记抗体-检测区抗体”复合物，标记物（如胶体金）聚集使检测区显色；3.对照区固定有另一株单克隆抗体，无论hCG是否存在均会与标记抗体结合，确保试纸有效（未失效）。
三、hCG检测的窗口期：hCG在尿液中出现的最早时间为着床后7~10天（约月经推迟1~2天），此时尿液中hCG浓度通常达20mIU/mL，试纸灵敏度阈值一般为25mIU/mL，因此过早检测（如月经推迟前）可能因hCG浓度不足导致假阴性。随着妊娠进展，孕4~8周hCG浓度达峰值（约10万~100万mIU/mL），此时检测准确性达98%以上（95%CI96%~99%）。
四、影响检测准确性的关键因素：1.尿液质量：晨尿中hCG浓度约为随机尿的2~4倍，建议检测前避免大量饮水（2小时内饮水＜500mL），以减少尿液稀释导致的假阴性；2.检测时间：排卵后14天内hCG水平较低，检测结果不可靠，需间隔3~5天重复检测；3.异常情况：葡萄胎、宫外孕等异常妊娠可能导致hCG异常升高，单次阳性需结合血hCG定量（＞2000mIU/mL提示宫内妊娠可能）及超声检查排除滋养细胞疾病。
五、特殊人群注意事项：1.育龄女性（18~45岁）月经规律者，月经推迟3~5天检测更准确；月经周期＞35天者建议在停经2周后检测。2.围绝经期女性（45~55岁）因内分泌波动可能出现月经紊乱，检测阳性时需排除卵巢肿瘤（如颗粒细胞瘤）等非妊娠hCG升高疾病。3.尿液样本需新鲜（2小时内检测），避免高温（＞37℃）或低温（＜4℃）储存，否则hCG活性降低导致结果偏差。
